Un article du Dr Philippe Mimouni paru dans la revue 98, mars 2018.

L’utilisation de la semence congelée a un peu un coté magique. En effet, elle nous permet plusieurs années après le décès d’un étalon
faire une portée dont il sera le père et ce même si les paillettes ont plusieurs dizaines d’année s (nous avons déjà utilisé en 2014 des
paillettes de 1978 avec une portée à la clef)
Pourquoi cette technique est elle peu utilisée en France alors que la pratique est largement rependue dans d’autres pays d’Europe (pays scandinaves) et dans la plupart des autres pays (Etats unis, Russie, Japon, Australie Etc.)
Nous allons essayer de répondre à cette question afin de vous convaincre d’utiliser régulièrement cette technique indispensable
aujourd’hui à la gestion génétique d’une lignée.
Dans une premier temps les différentes étapes techniques seront décrites et ensuite nous détaillerons la plupart des situations en
élevage où vous pourrez faire appel à l’utilisation de semence congelée : cette technique révolutionnaire nécessitant une rigueur
exemplaire sous peine de mauvais résultats.
L’insémination en semence congelée consiste à utiliser du sperme congelé et conservé à très basse température sous forme de paillettes de 0,25 ml ou de 0,5 ml ou des pastilles (« pellets ») de 1 ml.
L’engouement pour la cynophilie fait de cette technique une opportunité pour les éleveurs qui veulent parfaire leurs méthodes de sélection et s’assurer le maintien du potentiel génétique de leur élevage.

Quand conseiller la congélation du sperme d’un étalon :
Le praticien peut conseiller cet acte lorsqu’un étalon possède une grande valeur génétique, lorsque l’on veut pouvoir l’utiliser après sa disparition dans un but d’amélioration génétique(les croisements grand-père- petite fille, utilisés fréquemment en sélection canine sont grandement facilités), lorsqu’il risque de décéder prématurément (chien de chasse au sanglier, chien de sauvetage), lorsqu’un
traitement médical risque de le rendre stérile (Chimiothérapie, traitements hormonaux lors d’affection prostatique). L’insémination
en semence congelée permet d’utiliser la semence d’un étalon même si celui-ci n’est plus disponible pour des saillies. On peut également mentionner la technique aux propriétaires de mâles qui veulent garder un descendant pour des raisons sentimentales et en « remplacement » du clonage non réalisable chez le chien.
Enfin, cette technique permet les échanges internationaux de semence, particulièrement utiles lorsqu’il existe des barrières sanitaires ou douanières

Où peut-on faire congeler la semence d’un étalon en France ?
Il existe 4 banques de Semence Canine en France. 3 se situent au sein des Ecoles vétérinaires et une seule est privée :

Centre de Reproduction des Carnivores du Sud Ouest (CRECS)
Dr. Philippe MIMOUNI et Dr. Xavier LEVY
58 Boulevard des Poumadéres
Fr -32600 Isle Jourdain
vetreproduction@gmail.com
Deux sites répertorient les banques de semence canine en Europe
(www.evssar.org et www.Canine-Semenbanks-Europe.Com) et un
site aux USA (www.AKC.org)

Quel est le meilleur moment pour prélever un chien et
conserver sa semence.
Le moment idéal est entre deux et six ans. Cependant les conditions d’obtention des titres (travail et beauté) et l’utilisation souvent tardive de certains étalons ne permettent pas toujours d’envisager une congélation pendant cette période. On peut envisager la congélation de la semence d’un chien de tout âge (jusqu’à 15 ans !) a partir du moment il produit des spermatozoïdes mobiles, normaux et en quantité suffisante. D’autres facteurs que l’âge peuvent affecter la qualité de la semence, il faudra en tenir compte pour choisir le moment du prélèvement : abstinence prolongée ou au contraire sur utilisation, stress, compétition, saison chaude, toute affection hyperthermisante, libido faible, ect. Il faudra alors reporter le prélèvement de quelques mois pour avoir un échantillon correct
Dans certains cas (chien ayant une espérance de vie courte ou nécessitant une chimiothérapie) on peut éventuellement conserver des échantillons en dessous des normes tolérées mais dans tous les cas le propriétaire sera informé de la faible chance de réussite si les test de décongélation sont mauvais (inf à 50% de mobilité). Les techniques futures de procréation canine (insémination intratubaire,
ICSI) pourront peut être dans l’avenir permettre l’utilisation de semences inadaptées avec les techniques actuelles.

Comment est réalisée une congélation de semence Canine
1/ Accueil du propriétaire de l’étalon :
Recueil des attestations de propriété et du pédigrée du chien
Vérification de l’attestation de propriété et de l’identité du chien
Le propriétaire signe un contrat dans lequel il demande le prélèvement, l’examen, la congélation et le stockage de la semence de son étalon
2/ Réalisation de tests biologiques sur l’étalon
L’identification génétique permet d’éviter tout litige ultérieur possible avec l’utilisation de la semence congelée. La sérologie brucellose permet d’utiliser la semence vers l’exportation vers certains pays. Parfois une sérologie leptospirose est également demandée
3/Commémoratifs sur le passé reproducteur de l’étalon : Nous conseillons généralement de faire réaliser un prélèvement de sperme par le vétérinaire praticien dans le mois qui précède afin de s’assurer que la chien est facilement prélevable et que la qualité de la semence est correcte. Ceci est d’autant plus valable si le chien n’a jamais été prélevé ou s’il a eu une période d’abstinence supérieure à 6 mois. D’autre part, nous déconseillons toute saillie dans les 8 jours qui précédent.
4/Préparation des paillettes : Les paillettes doivent porter quatre indications :
– la date du prélèvement
– la race de l’étalon (numéro de code FCI)
– le numéro de tatouage
– le nom de l’étalon (ou ses 5 premières lettres)
4/Le prélèvement de sperme en présence d’une chienne en chaleur
-Séparation des trois fractions du sperme, seule la deuxième fraction dite spermatique est conservée.
Elle contient la majeure partie des spermatozoïdes de l’éjaculat.
5/ Examen du sperme
– Aspect : les échantillons contenant du sang ou de l’urine sont éliminés
– Examen de la mobilité au microscope à contraste de phase et d’une platine chauffante
– Calcul de la concentration à l’aide d’un densitomètre (Spermacue ND, Acucell ND)
– Recherche d’anomalies des spermatozoïdes
Ne sont conservés que les éjaculats dont la mobilité immédiate est supérieure à 70 % et dont les formes anormales des spermatozoïdes sont inférieures à 30% (sauf cas particuliers).
6/ Préparation du sperme dans un dilueur spécial (à base de glycérol) et remplissage des paillettes préalablement identifiées.
7/La congélation proprement dite (abaissement de la température par paliers)
8/Contrôle de qualité 24 heures post congélation : ne sont conservés uniquement les spermes dont la mobilité post décongélation est supérieure à 50%.
9/ Calcul du nombre de doses inséminantes stockées et envoi d’un rapport au propriétaire.
10/ Conservation des paillettes dans l’azote liquide à -196°C

La dose optimale recommandée par tous les spécialistes de la reproduction canine en Europe est de 150 millions de spermatozoïdes
mobiles. La réalité est souvent différente : en effet les doses inséminantes calculées par certaines banques de semence (notamment
aux usa) est souvent inférieure On reçoit régulièrement des doses de moins de 80 millions de spermatozoïdes mobiles. Les transactions sont réalisées par les propriétaires des femelles et ceux-ci sont rarement au courant des normes à exiger pour avoir des chances de réussites raisonnables.
Il ne faut pas confondre paillette et dose. En effet une paillette de 0.5 ml en général contient entre 50 millions et 100 millions de spermatozoïdes. Par exemple sur des paillettes à 50 millions avec une mobilité post décongélation de 60 %, il faut 5 paillettes pour
avoir la dose optimale.
Cette norme est modulable en fonction des races : on a ainsi besoin de moins de spermatozoïdes dans les petites races (80 à 100
millions de mobiles)

Le transport de la semence congelée
La semence congelée peut voyager en train ou en avion dans des récipients spéciaux (« dry shipper »). Ce sont des emballages isothermes qui contiennent de l’azote liquide réfrigéré entièrement absorbé dans un matériau poreux. Ils ne sont pas assujettis à la
réglementation sur les marchandises dangereuses. Il convient néanmoins d’anticiper l’envoi de la semence congelée, afin de pouvoir organiser correctement l’expédition.

Quelles sont les règles du succès de l’utilisation de la semence congelée.
On doit respecter impérativement 3 règles:
1/Le moment de l’insémination : L’intervention n’a aucune chance de succès si elle n’est pas mise en oeuvre exactement entre trois et
quatre jours après l’ovulation c’est à dire au moment de fécondabilité maximum. La survie des spermatozoïdes dépasse exceptionnellement 24 heures.
2/L’utilisation d’au moins une dose inséminante
3/La techniques d’insémination elle doit être intra-utérine (trans-cervicale ou chirurgicale)
Comment gérer un stock de paillettes d’un étalon :
La gestion de l’utilisation des paillettes est variable en fonction de plusieurs paramètres. Dans le cas où l’étalon est décédé et nous
n’avons pas un très grand nombre de doses inséminantes ou bien si ces doses sont de qualité moyenne, il est primordial de planifier
l’élevage avec une chienne ayant une capacité reproductrice prouvée : chienne ayant déjà eu une portée sans difficultés et sans
complications, ayant des chaleurs normales. Dans le cas où l’étalon est encore vivant, nous devons dans la mesure
du possible (semence du chien de bonne qualité et localisation permettant un envoi facile de l’échantillon) orienter le propriétaire
vers une insémination en semence réfrigérée.
Aspect réglementaire des échanges de sperme d’un pays à l’autre
La réglementation concernant les échanges de semence canine est très variable d’un pays à l’autre. Il faut se renseigner par avance pour savoir si un permis d’importation est exigé, si des contrôles sanitaires sont nécessaires (test sérologiques de dépistage de brucellose canine ou de leptospirose) ou si une carte d’identité génétique du chien donneur est demandée.

Quelles sont les situations où l’on peut utiliser de la semence congelée
1/ Aspect sentimental : même si cet aspect est bien loin de la conduite d’un élevage et est largement justifiable pour garder des qualités de chasses qui vous conviennent. Vous pouvez grâce à cette technique garder la génétique d’un chien qui a marqué votre existence. même si le clonage n’est pas réalisé en routine dans l’espèce canine vous pouvez de façon simple avoir pendant plusieurs générations des descendants directe de se chien
2/ Aspect Génétique : vous avez peut être dans le cadre d’une politique d’élevage atteint en grande partie ce que vous recherchez,
vous pouvez ainsi conserver cette génétique et être d’une part à l’abri d’une erreur d’élevage (introduction d’un défaut grave à la faveur d’une saillie) ou revenir plusieurs années plus tard sur le courant de sang direct. Si cet aboutissement est obtenu sur une femelle (on ne peut congeler en routine les ovocytes actuellement) pensez à congeler les mâles collatéraux.
3/ Aspect commercial :
La semence congelée vous permet d’expédier sans problème de la semence dans le monde entier sans aucun impératif par rapport au
timing de la saillie : ainsi l’acquéreur des paillettes peut très bien stocker la semence et l’utiliser quand bon lui semble.
4/ Aspect conservateur : un accident est malheureusement vote arrivé sur un sujet d’exception (renversé par une voiture, Maladie, sanglier lors d’une partie de chasse….) et il vaut mieux être prévoyant surtout sur un jeune sujet et garder des paillettes
4/Utilisation en cas d‘indisponibilité de l’étalon : substitution à la semence fraiche Votre chien part en concours en Serbie et on vous demande une saillie en France ? Si vous avez stocké des paillettes dans une banque de semence vous pourrez proposer quand même votre chien à la reproduction. Elle est pas belle la vie !!!
Cependant il faut garder en mémoire plusieurs éléments essentiels /
1/ ne jamais utiliser de la semence congelée sur une chienne ayant
déjà eu des problèmes de fertilité (par exemple une chienne restée
vide)
2/ faire réaliser un suivi d’ovulation très précis (une erreur de 12 heures est synonyme d’échec)
3/l’insémination doit être réalisée en intra-utérin c’est à dire par un praticien ayant été formé à cette technique
4/ si la dose utilisée est classiquement de 150 millions on conseil lors de l’utilisation pour suppléer un mâle indisponible des doses plus importantes ou bien de doubler l’insémination afin d’optimiser les chances de réussite. En saillie naturelle ou insémination en semence fraiche, le taux de réussite est autour de 85%, en semence congelée réalisée dans les règles de l’art le taux est de 70à 75%. Si la semence est de mauvaise qualité si l’insémination est réalisée dans de mauvaises conditions (non réalisée en intra-utérin ou semence de mauvaise qualité) le taux peut chuter à moins de 30%
Conclusion : L’engouement pour la cynophilie fait de cette technique une opportunité pour les éleveurs qui veulent parfaire leurs méthodes de sélection et s’assurer le maintien du potentiel génétique de leur élevage. Le chien doit être prélevé dans une banque de semence agréée et gérée par des vétérinaires spécialistes en Reproduction afin d’assurer que la progéniture soit correctement inscrite au LOF et que les résultats de congélation et de conservation soient optimisés
On peut dans l’avenir si les éleveurs Français et Etrangers jouent le jeu et prennent conscience de la puissance de cette technique avoir un catalogue conséquent d’étalons de renoms que vous allez pouvoir utiliser même quand ils sont en déplacement ou plusieurs années après leur décès.

Philippe Mimouni
Vétérinaire